細胞生物學實驗的日常，都是跟細胞培養(yǎng)、凍存和復蘇這些基本的操作密不可分的。在細胞凍存和復蘇領域一直奉行著一條黃金法則，那就是“慢凍快融”！ 實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。

 慢凍

細胞是很脆弱的，尤其是哺乳動物細胞，只有一層薄薄的細胞膜，沒有堅固的細胞壁保護，在進入凍存狀態(tài)前，緩慢的降溫過程有助于保存細胞的活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜（DMSO）作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。

快融

 細胞復蘇，是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng)，細胞恢復生長的過程。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成的損傷。

 最常見的復蘇工具

水作為一種使用廣泛的導熱介質，具有良好的導熱性，可以保證快速加熱，同時也可防止凍存管內部的局部過熱。水浴是細胞培養(yǎng)實驗室的標準配置之一，在進行細胞復蘇實驗時，無需額外的輔助設備或試劑。然，水浴經常是作為實驗室共享的設備，若無專人值守，則水浴槽內的水不會定期進行更換，就會攜帶污染，會間接導致復蘇細胞的污染風險。復蘇過程，常伴隨著對凍存管的晃動（晃動可以防止管內樣品產生溫度差異），管蓋處也有滲入水的可能。